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ELISA試劑盒操作中*的九種試劑

更新時間:2014-12-10   點(diǎn)擊次數(shù):1125次

    實(shí)驗前的準(zhǔn)備工作是非常重要的,操作者需要在實(shí)驗開始之前將所需材料準(zhǔn)備齊全。在ELISA試劑盒操作中,像蒸餾水、加樣器、振蕩器、磁力攪拌器等材料需自備,今天上海恒遠(yuǎn)來和您說說這其中*的九種試劑:
1. 稀釋液
2. ABTS使用液
3. 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體
4. 正常人血清和陽性對照血清
5. 終止液(2M H2SO4)
6. 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸)
7. 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液)
8. 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
9. TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液
    上面說的九種試劑是試劑盒之外的,試劑盒內(nèi)的洗滌緩沖液(50×)需要蒸餾水50倍稀釋,標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

  0  pg/ml空白對照原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
12.5 pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 25  pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 50  pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100  pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200  pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400  pg/ml6號標(biāo)準(zhǔn)品原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

    ELISA是一種免疫測定,應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)測定標(biāo)本的方法??捎米鱁LISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行ELISA試劑盒操作測定,有些則需經(jīng)預(yù)處理。

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